天德悦(北京)生物科技有限责任公司
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Western Blot
RT-PCR
IP&Co-IP
ChIP
载体构建和卵白表达
EMSA
样品处置
小鼠多克隆抗体制备
小鼠单克隆抗体制备
(单)双荧光素酶检测
细胞相干实行办事1
细胞相干实行办事2
CRISPR/Cas9介导基因敲除细胞系创建
ips细胞诱导,判定和定向分解
细胞寄送处置留意事变
(单)双分子荧光互补实行

 
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关于九游会
公司称号:天德悦(北京)生物科技有限责任公司
### 公司网址:www.ahyuebing.com                                            Email: >###            邮编:102299
公司>###36号院2号楼2层203            TEL:+8610-80117836                        

◆细胞转染,波动细胞系创建及细胞模子

一、办事内容

1、细胞转染和波动表达细胞株挑选

经过转染试剂或电穿孔方法等方法,将目标基因导入贴壁细胞或悬浮细胞24-48小时后,目标基因即在细胞内表达。此时为了创建波动细胞系,可依据差别基因载体中所含的抗性标志,选用响应的药物对靶细胞举行挑选,从而失掉波动表达外源基因的细胞克隆。察看目标基因及其表达卵白在某种细胞中的功效(短工夫即可举行察看,但效应会很快丧失)。

2、针对差别品种细胞利用药物,低氧,压力等外源要素举行安慰等处置,创建相干的细胞模子,从而举行后续的研讨事情。

二、样品要求(样品处置及保管见附件)

1干冰运输:取对数生临时的细胞,消化后低速离心1000rpm5min搜集细胞,参加过量配制好的冻存液后奏乐匀称。将细胞分装入冻存管中,标明细胞的称号、细胞代次、冻存工夫及操纵者;放4℃冰箱30min-2030min1h-80℃过液,然后放入液氮罐;细胞数量不少于5×106/ml

2常温运输:细胞贴壁掩盖瓶底面积达40%以上时,装满培育液,瓶口用封口膜封好,装入盒子,盒子里用泡沫或棉花塞满,让瓶子牢固在盒子中。

三、办事特点

1、针对差别细胞系挑选符合的转染试剂和质粒浓度配比,进步转染服从和卵白表达量

2、丰厚的抗生素挑选履历和单细胞克隆判定办法进步实行服从

3、构建的波动表达细胞株可波动传代,少少产生性状丧失

四、免费尺度

办事项目

免费尺度¥

实行周期

卵白瞬时表达或敲低

基因表达或敲低载体构建

请拜见载体构建目次

2-3

质粒大提(含去内毒素)

700/质粒

1

载体转染

3000/样品

1

Western Blot检测卵白表达或敲低

2000/目标卵白/

2

卵白波动表达细胞株构建(混淆克隆)

表达载体构建

请拜见载体构建目次

2-3

质粒大提(含去内毒素)

700/质粒

1

转染和抗生素挑选

40000/细胞系

3-4

Western Blot检测波动细胞株卵白表达

2000/目标卵白/

2

卵白波动表达细胞株构建(单克隆)

表达载体构建

请拜见载体构建目次

2-3

质粒大提(含去内毒素)

700/质粒

1

转染和抗生素挑选

50000/细胞系

6-8

Western Blot检测波动细胞株卵白表达

2000/目标卵白/

2

卵白敲低细胞系构建(单克隆)

shRNA表达载体的构建

请拜见载体构建目次

2-3

质粒大提(含去内毒素)

700/质粒

1

转染和抗生素挑选

60000/细胞系

6-8

Western Blot检测敲低细胞株卵白表达

2000/目标卵白/

2

卵白真核表达(排泄表达)

排泄型表达载体的构建

请拜见载体构建目次

2-3

质粒大提(含去内毒素)

700/质粒

1

细胞转染

3000/质粒

2

卵白表达检测(Western Blot ELISA

2000/目标卵白/膜;600/

2

卵白表达和纯化

20000/mg

2

五、客户提供质料

1、待克隆基因和载体信息,待敲低基因信息和shRNA序列信息(如无相干shRNA序列信息,九游会可代为设计并收取相干用度);

2、待转染细胞株(如需利用常用肿瘤细胞株,如293/293THeLa等可由九游会提供);

3、阳性比较样品(只管即便提供)

4、相干文献(可选)

六、提交给客户后果

1、构建完成的载体和甘油菌株;

2完备测序陈诉和序列碱基图

3、载体真核表达判定后果

4、载体真核表达卵白

5、波动表达细胞株>1×107

6、波动敲低细胞株>1×107

7、完备实行陈诉(包罗基因扩增图,细胞株过表达和敲低检测后果图等)

 

 

◆细胞功效学检测

一、办事内容

1Transwell检测

2、细胞划痕检测

3、细胞增殖/克制曲线

4、细胞生长曲线

5、细胞凋亡检测

6、细胞生机检测

7、细胞凋亡/自噬模子

8、细胞增殖模子

9、订制细胞模子

 

二、样品要求(样品处置及保管见附件)

1、待检测细胞系及培育条件等信息(九游会可收费提供罕见人和小鼠细胞系,如HeLa293T3T3等)

2、实行相干药物必需到达剖析纯(特别药物也可以利用化学纯),且泉源牢靠。

三、办事特点

1、可依据差别实行目标协助客户选择最优实行办法

2、依据差别细胞系创建相干的研讨模子

四、免费尺度

办事项目

免费尺度¥

实行周期

细胞生机检测

细胞培育

1500/细胞

待定

MTT

300/样品(三个反复)

1-2

MTS

2000/细胞/处置(三个反复)

1-2

CCK8

2000/细胞/处置(三个反复)

1-2

参加药物或别的处置后检测

请询价

2

细胞凋亡检测

Tunel法(Roche试剂盒)

500/样品(5500/试剂盒)

(含荧灯光显示微镜照相)

2-3

流式细胞术

600/样品(含上机费)

2-3

琼脂糖凝胶电泳检测法

300/样品

2

细胞曲线

细胞生长曲线

2000/细胞

1-2

细胞增殖/克制曲线

3000/细胞/处置

1-2

细胞侵袭(Transwell法)和迁徙检测

Transwell体系###, 8.0 μm孔径)

8000/

2-3

Transwell体系###, 8.0 μm孔径)

8000/

2-3

细胞划痕检测

2000/细胞/处置

2-3

细胞模子创建

细胞凋亡/自噬模子

8000/株细胞

4-6

细胞增殖模子

6000/株细胞

4-6

别的订制细胞模子

请询价

4-6

五、客户提供质料

1、待检测或处置的细胞株

2、细胞处置相干药物或特别试剂

3、相干文献(可选)

六、提交给客户后果

1、响应的数据后果、图片和剖析后果

2、创建响应模子的细胞株

3、完备实行陈诉

 

 

◆原代细胞分散培育

一、办事内容

1、原代细胞分散培育

2、原代干细胞培育

二、样品要求(样品处置及保管见附件)

1、干冰运输:奇怪的构造或细胞块离体后-80℃保管,并用干冰尽快送至九游会实行室;

2、实行植物运输:实行植物(如小鼠、大鼠或兔)用符合的运输笼装好后快递或送至九游会实行室;

三、办事特点

1、拥有多种原代细胞分散培育履历

2、分散培育的细胞具有很高的成活率

四、免费尺度

办事项目

免费尺度¥

实行周期

小鼠原代细胞系创建

40000/细胞系

3-4

大鼠原代细胞系创建

40000/细胞系

3-4

原代细胞系创建

40000/细胞系

3-4

人原代细胞系创建

60000/细胞系

3-4

特别原代细胞系创建

请询价

4-6

原代细胞系判定(WBIF等)

参考相干实行目次

参考相干实行目次

原代干细胞培育

请询价

依据细胞品种待定

五、客户提供质料

1照实验植物没有特别要求,如转基因小鼠等。九游会可卖力间接从所需实行植物分散培育出所需原代细胞。

2、关于细胞培育条件的阐明:九游会提供DMEM培育基,RPIM1640培育基以及G418抗生素,如需别的培育基及挑选条件,也宴客户一并提供。特别基因宴客户提供响应抗体以供检测

 

六、提交给客户后果

1、分散培育的波动原代细胞株>1×107

2.相干判定实行陈诉;

3、实行陈诉;

 

 

 
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