◆CRISPR/Cas9介导基因敲除细胞系创建 办事编号：FW10
CRISPR/Cas9（Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats）是一种由RNA引导的Cas9核酸酶对靶向基因举行编辑的技能，其原理是经过crRNA（ CRISPR-derived RNA ）碱基配对与 tracrRNA （trans-activating RNA ）联合构成 tracrRNA/crRNA 复合物，并将Cas9 核酸酶带到基因组上的详细靶点，并在Cas9 卵白介导与crRNA 配对靶位点序列举行特异性辨认，从而对特定基因位点举行切割招致渐变。
一、办事内容
1. sgRNA设计和高效sgRNA挑选；
2. sgRNA表达载体构建；
3. sgRNA和Cas9质粒共转染细胞和敲除细胞株挑选及判定。
二、免费尺度
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办事项目
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内容阐明
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免费尺度￥
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实行周期
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sgRNA设计和挑选
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针对特异性基因设计多条sgRNA序列
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5000
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1周
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高效sgRNA挑选载体构建
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选择敲除服从最高的两条sgRNA构建表达载体
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50000/基因
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4-6周
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基因敲除细胞系的创建
（提供1-2个敲除基因型细胞系和WT细胞系）
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利用sgRNA和Cas9共转染细胞并对目标基因举行敲除
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250000/基因/细胞系
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3-5月
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三、实行要求
1. 客户提供培育形态精良的目标细胞；
2. 客户提供待敲除基因信息，包罗基因称号，NCBI号等；
三、终产品
1. 完备实行陈诉
2. sgRNA挑选后果（含sgRNA序列和PCR判定后果等）
3. 基因敲除细胞系（细胞数量>1*106）（含基因敲除判定后果）
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